Косметика, медицина

фическим методами) или на измерении текущей (спектрофотометриче-ским) или остаточной (перманганатометрическим, йодометрическим и другими титриметрическими методами) концентрации пероксида водорода.

Креатинкиназа

Креатинкиназа или креатинфосфокиназа (КК; КФ 2.7.3.2.) катализирует обратимую реакцию фосфорилирования креатинина с участием АТР в результате чего образуются креатинфосфат и ADP. КК является ди-мером состоящим из двух субъединиц, каждая с молекулярной массой около 40 кДа. Субъединицы В (от brain - мозговая) и М (от muscle - мышечная) закодированы в разных генах. Фермент существует в виде трех изоферментов: КК-ВВ (КК-1) - мозговой, КК-МВ (КК-2) - сердечный и КК-ММ (КК-3) - мышечный. КК-ВВ присутствует в значительных количествах в мозге, простате, желудке, легких, мочевом пузыре, уретре, плаценте, щитовидной железе. КК-МВ в основном находится в сердечной мышце (25-46 % от общей активности КК кардиомиоцита) и в небольшом количестве в скелетных мышцах (менее 5 % общей активности). КК-ММ присутствует в основном в клетках скелетных и сердечной мыщц. Активность КК-ММ в сыворотке составляет 94-96 % от общей активности КК, КК-МВ -4-6 %, КК-ВВ - следы или активность не определяется.

Все три изофермента обнаружены в цитозоле клеток или связаны с миофибриллами. Обнаружена и четвертая митохондриальная форма креа-тинкиназы (КК-Mt), которая отличается от других форм иммунологически, а также по электрофоретической подвижности. Она локализована между внутренней и наружной митохондриальной мембранами, в сердце составляет до 15 % общей КК активности.

Активная КК может присутствовать в сыворотке в виде 2 макромо-лекулярных комплексов: макро КК тип1 и тип 2. Тип 1 - это КК-ВВ, связанная с IgG, или КК-ММ, связанная с IgA; тип 2 - это олигомеры КК-Mt.

Нормальная активность КК (общая) может варьировать в зависимости от метода: 10-195 МЕ/ л (Назаренко Г.И. и др., 2002).

Норма для изоферментов сыворотки крови: КК-ВВ - 0 %; КК-МВ -0-3 %; КК-ММ - 97-100 %.

Общая КК повышается при многих заболеваниях: травмы, операции, инфаркт миокарда, уменьшение кровоснабжения мышц, миопатии, дерма-томиозит, мышечные дистрофии, миокардиты, отравления, сопровождающиеся комой, гипотериоз, инфекционные болезни (например, брюшной тиф). Иногда небольшое увеличение отмечается при артритах, застойной сердечной деятельности, тахикардии, эмболии легочной артерии.

Активность КК в сыворотке, как правило, имеет обратную зависимость с тиреоидной функцией щитовидной железы. Около 60 % больных гипотериозом имеют уровень КК выше нормы с превышением верхней границы в среднем в 5 раз. Основной изофермент при этом КК-ММ, хотя у

13 % больных повышена и КК-МВ, что свидетельствует о вовлеченности в патологический процесс не только скелетных, но и сердечной мышцы. В то же время у больных с гипертиреозом имеется тенденция к низким значениям активности КК в сыворотке.

При инфаркте миокарда регистрируемое повышение активности КК наблюдается уже в течение 3-6 ч после ангиозного приступа. Однако определение активности ранее 8 ч дает положительные результаты в 31 % случаев. Активность КК является достоверным тестом инфаркта миокарда, начиная с 8-10 ч после начала болевого приступа. Максимальный уровень ее достигается в течение 24 ч, и даже при обширном инфаркте активность КК может возвратиться к норме в течение последующих 48 ч. Относительное повышение активности КК при инфаркте миокарда выше, чем других ферментов. Наиболее информативно исследование активности КК в динамике - каждые 4-6 ч в течение суток.

Хотя активность КК при инфаркте миокарда является очень чувствительным тестом, однако, на него нельзя полагаться при однократном определении и отсутствии других показателей, т. к. повышение может быть вызвано и рядом других причин, отмеченных выше, а также употреблением алкоголя, интенсивной физической нагрузкой, состоянием щитовидной железы, отравлением снотворными средствами, введением некоторых лекарственных препаратов (клофитрат, карбеноксалон). Резкое повышение активности КК (более чем в 10 раз) возникает в 1-2-й день нарушения мозгового кровообращения, достигая максимума на 3-й день.

КК-ММ увеличивается в сыворотке при тех же состояниях, как и общая КК.

КК-МВ значительно увеличивается при инфаркте миокарда, определение изофермента имеет диагностическое значение, если общая активность фермента в сыворотке крови повышается более чем в 1,5 раза по сравнению с верхней границей нормы. Помимо инфаркта миокарда КК-МВ может незначительно возрастать при миокардитах, стенокардии, затяжной аритмии, шоке, тяжелых отравлениях.

КК-ВВ в сыворотке крови незначительно повышается при некоторых формах рака (легкого, кишечника, мочевого пузыря, предстательной железы), травме сердечной мышцы, заболеваниях соединительной ткани. При родах КК-ВВ может увеличиваться в сыворотке до 6 раз (источником являются матка и плацента). У новорожденных при родовой травме мозга активность КК-ВВ в сыворотке повышена.

Макро КК тип 1 обнаруживается в сыворотке взрослых при заболевании желудочно-кишечного тракта, аденоме, карциноме, повреждениях сердечной и скелетной мышц и в состоянии с высокой вероятностью летального исхода. Иногда макро КК тип 1 встречается у женщин старше 50 лет.

Макро КК тип 2 обнаруживается в сыворотке взрослых с тяжелой формой рака или болезни печени, а также у детей с поражением сердечной

мышцы. Появление КК-Mt - плохой прогностический признак, среди таких больных высока смертность.

Существует три общепризнанных методических подхода для разделения изоферментов КК: электрофорез, хроматографические и иммунологические методы.

Электрофоретическим методом (на агаре, агарозе или ацетате целлюлозы) можно разделить фракции КК. Визуализация электрофоретиче-ских полос изоферментов проводится, как правило, с использованием НАДФН флуоресценции в ультрафиолетовой области спектра (360 нм). Поэтому эта процедура достаточно трудоемкая и требует оснащения импортной техникой.

Ионообменной или абсорбционной хроматографией разделяют изо-ферменты КК на несколько фракций. Изоферменты КК как правило абсорбируются на геле, с которого затем элюируются буферами. Выпускаются специальные коммерческие миниколонки: метод простой и быстрый, основная трудность - разделение фракций при большом повышении количества КК-ММ в патологических случаях.

Иммунологические методы основаны на измерении активности КК в присутствии специфической антисыворотки, содержащей моноклональные или поликлональные антитела против М или В субъединиц. Коммерческие наборы, основанные на технике преципитации, позволяют выявлять КК-МВ при существенном ее повышении с коэффициентом вариации 10-20 %, тем не менее, эти тесты выполняются быстро, как правило, не требуют специальной аппаратуры и могут использоваться индивидуально, что особенно удобно при экспресс-диагностике. Выпускаются коммерческие наборы для фотометрического определения КК-МВ, основанные на определении активности КК при ингибировании М-субъединицы. Нормы для процентного распределения активности изофермента КК-МВ в общей КК-активности в этом случае существенно отличаются от электрофоретиче-ского распределения.

Лактатдегидрогеназа

Лактатдегидрогеназа (ЛДГ; КФ 1.1.1.27) катализирует обратимое восстановление пирувата до лактата, в качестве кофермента используется НАДН. ЛДГ имеет молекулярную массу около 134 кДа, это тетрамер, состоящий из двух субъединиц - М (muscle - мышечная) и Н (heart - сердечная). В сыворотке присутствуют 5 изоферментов, различающиеся составом субъединиц. В порядке снижения их электорофоретической подвижности (движения по направлению к аноду) их обозначают как ЛДГ-1 (Н4), ЛДГ -

2 (Н3М), ЛДГ -3 (Н2М2), ЛДГ-4 (Н1М3), ЛДГ-5 (М4). Избыток как пирувата,

так и лактата, используемых в качестве субстрата, подавляет активность фермента, при этом эффект пирувата выше. Норма (варьирует в разных методах): 240-480 МЕ/л (Назаренко Г.И. и др., 2002). Заказать профессиональную косметику цены. Ищете косметику заказать косметику.