Косметика, медицина

теря белка с мочой), ожирении, в том числе при сахарном диабете, психозе, раке молочной железы.

Снижение значений наблюдается при печеночных патологиях: цирроз, гепатит, метастатический рак печени, застойная печень при сердечной недостаточности (низкая активность указывает на тяжелое течение болезни и является плохим прогностическим признаком), а также при острой или хронической интоксикациях фосфорорганическими инсектицидами (хлорофос, дихлофос), инфаркте миокарда, легочной эмболии, онкологических заболеваниях (раковая кахексия), на поздних сроках беременности и при синдроме мальабсорбции. Применение некоторых лекарственных препаратов (например, оральные контрацептивы, анаболические стероиды, глюкокортикоиды, циметидин, циклофосфа-мид и др.), мышечные дистрофии сопровождаются снижением активности фермента.

Эластаза

Эластаза-1 (панкреатическая) является протеолитическим ферментом, синтезируется в ацинарных клетках поджелудочной железы и экскретируется в просвет двенадцатиперстной кишки вместе с другими ферментами, в виде предшественника - проэластазы, которая активируется трипсином. Эластаза абсолютно специфична для поджелудочной железы и не детектируется ни в каких других органах или тканях. В сыворотке крови человека содержатся высокоактивные ингибиторы эласта-зы: альфа-1-антитрипсин и альфа-2-макроглобулин. Ингибиторы регулируют уровень активности эластазы в соответствии с физиологическими потребностями. В крови здоровых людей активность панкреатической эластазы 1 почти не определяется или очень низкая (Норма: 0,14,0 нг/мл). Сывороточная эластаза, вследствие воспалительных процессов поджелудочной железы, попадает в общий кровоток через поврежденные клеточные мембраны. Подобно другим панкреатическим ферментам (амилаза, липаза) показатель эластазы панкреатической начинает увеличиваться в крови в острый период панкреатита, что позволяет поставить диагноз этого заболевания. Концентрация фермента начинает возрастать уже через 6 часов от начала заболевания, а через 48 часов достигает максимальных показателей, свидетельствующих о развитии острого панкреатита. Эластаза панкреатическая имеет более длительный период полураспада, чем амилаза и липаза, поэтому ее концентрация остается повышенной в течение нескольких дней (в основном 3-5 дней, в отдельных случаях до 10 дней). Этот тест назначается в комплексе с другими тестами для дифференциальной диагностики, либо подтверждения диагноза «острый панкреатит».

Эластаза (в кале). Человеческая панкреатическая эластаза-1 не разрушается при прохождении по кишечнику. Определение панкреатической

эластазы-1 в кале - новый неинвазивный тест для оценки экзокринной функции поджелудочной железы. Скрининг эндокринной панкреатической недостаточности показан, когда подозревают наличие хронического панкреатита или кистозного фиброза, а также при длительном мониторинге уже выявленной недостаточности поджелудочной железы при хроническом панкреатите. Ориентируясь на уровень эластазы 1 в кале, можно более точно назначать ферментные препараты и делать прогноз заболевания.

Для определения фермента кал собирают в течение 72 ч и анализируют в тот же день: при необходимости он может быть заморожен при -20 °С. На результаты определения панкреатической эластазы-1 в кале не влияет проведение заместительной терапии препаратами ферментов поджелудочной железы. Уровень эластазы-1 в стуле определяется иммуноферментным методом с использованием моноклональных

антител (Elastase 1 stool test®, ScheBo Biotech, Германия) и в норме составляет не менее 200 мкг/г кала. Более низкие показатели свидетельствуют о наличии экзокринной панкреатической недостаточности. Специфичность теста при исследовании кала составляет 94 %, чувствительность - 93 % - Stein J. et al., 1996]. Определение эластазы-1 в стуле показано во всех случаях, когда имеется подозрение на экзокринную недостаточность поджелудочной железы и обсуждается вопрос о применении препаратов панкреатических ферментов, так как использование этого метода позволяет избежать их необоснованного назначения. Снижение активности панкреатической эластазы-1 в кале выявляют у больных с хроническим панкреатитом, раком поджелудочной железы, сахарным диабетом типа 1 (менее 100 мкг/г у 3 % больных) и типа 2 (менее 100 мкг/г у 12 % больных), у детей с муковисцидозом, что отражает недостаточность экзокринной функции поджелудочной железы в данных группах пациентов.

ФЕРМЕНТЫ КАК АНАЛИТИЧЕСКИЕ РЕАГЕНТЫ В КЛИНИЧЕСКОЙ ХИМИИ

До недавнего времени ферменты служили лишь объектом исследования в клинической биохимии, и лишь сравнительно недавно они стали использоваться, как аналитические реагенты, то есть как реактивы для количественного определения других веществ.

Преимущества ферментативных методов исследования: высокая точность, специфичность (в силу специфичности используемых ферментов), чувствительность. К этим «трем китам», на которых стоят ферментативные методы, следует добавить простоту проведения анализа, значительное сокращение времени исследования и, часто, отсутствие необходимости построения калибровочных графиков.

Использование ферментов как аналитических реагентов началось с так называемого оптического теста Варбурга. Этот тест основан на том, что восстановленные формы никотинамидадениндинуклеотидов (НАДН и НАДФН) имеют выраженный максимум поглощения в ультрафиолетовой области при 340нм, тогда как их окисленные формулы (НАД и НАДФ) этого максимума не имеют. Это позволяет следить за ходом ферментативной реакции по увеличению или уменьшению величины оптической плотностью при 340 нм, т.е. по увеличению или уменьшению содержания НАДН + Н+ (или НАДФН + Н+) в анализируемом образце. Простейшим примером использования оптического теста Варбурга служит реакция, катализируемая ЛДГ:

Пируват + НАДН. Н + -Лактат + НАДН+

На рисунке представлено изменение оптической плотности в ходе реакции: