Косметика, медицина

При оценке функции печени все ферменты сыворотки можно разделить на универсально распространенные энзимы, органоспецифичные ферменты и экскреторные ферменты. К 1-й группе ферментов относятся трансаминазы и фруктозо-1,6-бисфосфатальдолаза. Во 2-ю органоспецифических ферментов может быть отнесен комплекс энзимов: фруктозо-1-фосфатальдолаза, орни-тинкарбомоилтрансфераза, сорбитдегидрогеназа, уроканиназа. К 3-й группе экскреторных ферментов можно отнести щелочную фосфатазу, Р-глюкуронидазу и некоторые др. При различных формах поражения печени могут быть выделены характерные изменения ферментного профиля сыворотки; сочетание различных проб может помочь дифференцировать вирусный гепатит от токсического, разграничить различные виды желтух, уточнить причину, остроту, тяжесть и прогноз болезни. Следует подчеркнуть, что особое значение в трактовке биохимических тестов приобретают сопоставления их с особенностями клиники.

В некоторых случаях при энзимодиагностике для суждения об активности фермента не обязательно непосредственное его исследование, а можно ограничиться определением легко доступных метаболитов в крови и моче, изменение которых может отражать функцию той или иной ферментной системы. При этом необходимо знание механизма действия ферментов, его регуляции и взаимосвязи ферментативных процессов.

Необходимо помнить, что при трактовке данных энзимодиагностики рекомендуется учитывать особенности функционирования биокаталитических систем, среди которых особое значение имеет биологическая индивидуальность. В настоящее время четко показано, что здоровым людям присущ генетически обусловленный полиморфизм белкового спектра, не связанный с развитием каких-либо патологических состояний. Такой полиморфизм обнаружен и в отношении ферментов. Вероятно, в будущем станет возможным объединение людей в группы в зависимости от особенностей генетического полиморфизма, характеризующегося различными ферментными профилями. При оценке результатов энзимодиагностики необходимо учитывать также суточные колебания ферментативной активности и другие биоритмы. Наличие таких колебаний с большим размахом от среднего значения доказано экспериментально. Наконец, следует помнить о важнейшей особенности живого организма - адаптации. Изменение активности фермента может быть вызвано качеством и количеством питания или приемом определенных фармакологических средств, которые могут выступать в качестве индуктора ферментсинтезирующей системы (или, наоборот, ингибировать ее отдельные звенья). Хорошо известно, что почти любое лекарство оказывает влияние на состояние ферментных систем, и это часто является решающим фактором в клиническом эффекте действия лекарственных веществ.

В клинико-диагностических лабораториях (КДЛ) измерения активности ферментов обычно проводят в сыворотке крови, но ферменты можно

определять и в других жидкостях организма: моче, соке поджелудочной железы, ликворе, слезной жидкости, где изменение их активности также имеет существенное клинико-диагностическое значение.

Гипоферментемия встречается относительно редко и касается в основном секреторных ферментов. В подавляющем большинстве случаев она связана с генетически детерминированными нарушениями синтеза определенных энзимов, реже - с ингибированием, усиленной деградацией или экскрецией.

Дисферментемия обусловлена в основном появлением в крови орга-носпецифических ферментов.

Гиперферментемия свидетельствует о некрозе или лизисе клеток, либо о нарушении проницаемости клеточных мембран из-за дефицита кислорода, истощения глюкозы, действия лекарств и других ксенобиотиков, токсинов, бактерий, вирусов и др. Развитию гиперферментемии способствует клеточная пролиферация, усиление синтеза энзимов клетками, повышение концентрации активаторов в кровяном русле.

Основной трудностью использования определения активности ферментов в диагностических целях является отсутствие специфичности повышения ферментативной активности для повреждения определенной ткани или органа. Поскольку многие ферменты присутствуют в разных тканях и органах, то повышение их активности в сыворотке может быть связано с повреждением любого из этих органов. Задача дифференциальной диагностики может быть решена одним из следующих способов:

- Определение более чем одного фермента. Разные ткани содержат ферменты в разных количествах. Так, АлАТ и АсАТ содержатся в гепато-цитах и кардиомиоцитах, но АлАТ существенно больше в печени, а АсАТ в сердце. Поэтому при повреждении печени относительно больше повышается АлАТ, а при повреждении сердца - АсАТ.

- Определение спектра изоферментов. Данный подход основан на том, что отдельные изоформы характерны для разных тканей.

- Определение активности ферментов в динамике. Скорость изменения активности фермента в сыворотке определяется разницей между скоростью его появления в сыворотке и скоростью удаления из системы циркуляции. При инфаркте органа и некрозе поврежденных клеток в сыворотке крови происходит повышение активности внутриклеточных ферментов, специфичных для данной ткани, затем после выхода всего фермента активность его снижается. Важным является определение динамики изменения фермента и определение его активности в период повышения в сыворотке, т. к. слишком раннее взятие пробы для анализа может предшествовать подъему активности, слишком позднее - также не позволит получить необходимую информацию.

Не всегда активность фермента в сыворотке отражает тяжесть заболевания. Так, острое повреждение клеток при вирусном гепатите может

сопровождаться очень высоким подъемом активности ферментов, которая будет падать по мере выздоровления. В то же время при циррозе печень может быть значительно сильнее вовлечена в патологический процесс, но скорость повреждения клеток ниже и активность ферментов в сыворотке будет повышена незначительно или даже находиться в пределах референтных значений. Этот пример еще раз подчеркивает, что любые результаты по исследованию активности ферментов в сыворотке должны быть обязательно сопоставлены с другими лабораторными анализами и с клинической картиной заболевания.

Перед тем как указывать на возможность патологического процесса, необходимо исключить возможность неспецифического повышения активности ферментов в сыворотке. Так, относительно невысокое повышение в плазме активности трансаминаз характерно для многих неспецифических патологических процессов. Тяжелая физическая работа, массивные внутримышечные инъекции могут привести к повышению активности КК в сыворотке. Некоторые лекарственные средства, в частности фенитоин, фенобарбитал могут индуцировать синтез микросомального фермента ГГТ и вызвать его повышение в сыворотке без всякого заболевания. Активность ферментов в сыворотке может меняться в результате агрегации с образованием макромолекул, например, при образовании комплексов с иммуноглобулинами, в которые вступают ЛДГ, ЩФ и КК.

ОБЩИЕ ПРАВИЛА РАБОТЫ С ФЕРМЕНТАМИ И НЕКОТОРЫЕ ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Ферменты, как все белки, являются относительно неустойчивыми веществами. Они легко подвергаются денатурации и инактивации. Приступая к работе, надо внимательно изучить и осознанно выполнять прилагаемую к наборам инструкцию. Работая с ферментами (будь то ферментативные наборы для определения субстратов или активности ферментов или контрольные материалы, содержащие ферменты), следует соблюдать простые правила, вытекающие из общих для всех ферментов свойств.

1. Нельзя сильно встряхивать растворы ферментов и допускать образование пены при их перемешивании, т. к. ферменты при этом могут инак-тивироваться в результате воздействия на них кислорода воздуха.

2. Растворенные, лиофильно высушенные реагенты, контрольные материалы и контрольные сыворотки, содержащие ферменты, перед использованием необходимо выдержать при комнатной температуре в течение времени, указанного в инструкции, чтобы фермент пришел в конфор-мационно активное состояние. Необходимо строго соблюдать условия ферментативной реакции, указанные в инструкции: время и температуру инкубации, соотношение реагент/сыворотка. Заказать christina косметику вопросы. Заказать christina косметику по каталогу.